Férfi meddőségi vizsgálatok

A humán spermiumok fiziológiás érési folyamatához a reaktív oxigéngyökök (Reactive Oxigen Specimen-ROS) kontrolált jelenléte alapvető fontosságú. Azonban, kóros körülmények között (főleg gyulladás) a ROS termelődés megemelkedik. A kontrolálatlanul magas ROS mennyiség képes súlyosan károsítani a spermiumok DNS állományának integritását, ezáltal veszélyeztetni az embrió egészséges fejlődését. Fiziológiás állapotban egyensúly áll fenn az oxigén gyökök keletkezése és lebontása/lebomlása között. A felesleges oxigén gyököket a szervezet enzimatikus és nem enzimatikus úton eliminálja. A testi sejtek esetében az antioxidáns mechanizmusok főleg a sejtek citoplazmájban találhatók, míg a spermiumok oxigén gyökökkel szembeni védelmét az ondóplazmában levő antioxidáns mechanizmusok látják el. Az ondóban elégtelenül működő antioxidáns mechanizmusok az oxigén gyökök mennyiségi növekedéséhez vezetnek nemcsak az ondó plazmában, hanem a spermiumokban is.
 
A spermiumok ROS tartalmát és a ROS pozitív sejtek mennyiségét áramlási citometriával rutinszerűen mérni lehet. Emelkedett értékek esetében a páciens antioxidáns kezelése indokolt lehet. Azonban nagyon fontos, hogy az antioxidáns dózisát az ondó teljes antioxidáns kapacitásához kell/kellene szabni. Ellenkező esetben a kontrollálatlan antioxidáns kezelés a fiziológás szint alá képes csökkenteni a ROS szintet, mely már károsan érintheti a spermiogenezist. Azon pácienseknél, ahol emelkedett ROS szintet mérünk, az antioxidáns kezelés megkezdése előtt és közben is folyamatosan és párhuzamosan ellenőrizni kellene, a rutin spermiogram mellett, a total antioxidáns kapacitást (Total Antioxidant Capacity-TAC), a ROS szinteket és a DNS fragmentáltság mértékét. Ezen törekvés támogatásához beállítottuk az ondó teljes antioxidáns kapacitás mérését.
 
A vizsgálat során az ondó felülúszóban megtalálható különböző antioxidáns hatású összetevők együttes aktivitását mérjük. Az ABTS dekolorizáció-esszé alapja, hogy az ABTSből (2,2'-azino-bisz(3-etilbenztiazolin-6-szulfonsav)) képződő zöld termék keletkezését a mintában levő antioxidánsok lassítják, így a szín az antioxidánst nem tartalmazó kontrollhoz képest halványabb. A színintenzitást spektrofotométerrel mérjük 405nm-en. A minták aktivitását a Trolox (6-hidroxi-2,5,7,8-tetramethmetilkromán-2-karboxilsav) nevű mesterséges E-vitamin analóg antioxidáns aktivitásához viszonyítva adjuk meg (Trolox ekvivalens antioxidáns kapacitás).
 
Irodalom:
Agarwal A., Gupta S., Sharma R. (2016) Antioxidant Measurement in Seminal Plasma by TAC Assay. In: Agarwal A., Gupta S., Sharma R. (eds) Andrological Evaluation of Male Infertility. Springer, Cham